аЯрЁБс>ўџ +-ўџџџ*џџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџьЅС@ №Пй bjbjюFюF "Œ,Œ,йџџџџџџˆ6666666Jnnnn z Jt Ж’’’’’’’’ѓѕѕѕѕѕѕ$* R| t 6’’’’’ 66’’. ŒŒŒ’ж6’6’ѓŒ’ѓŒŒ66S’† ыGЦЈФnh ѓD 0t ',№ r№ SJJ6666№ 6S ’’Œ’’’’’  JJ$n‚ JJnBAC miniprep protocol Broth culture DNA Spin down ~1.4mL culture for 1 min on a tabletop c’fuge Remove excess broth, and resuspend pellet in 100ul 10mM EDTA Add 200 ul 0.2N NaOH, 1% SDS Add 150ul 5M KOAc, pH 4.8 (147.3g KoAc, 115mL glacial acetic acid, add H20 to 500mL total, solution stored at 4 degrees) Spin and place liquid phase (i.e. not smeared cell walls) into a clean tube Phenol Chloroform extract DNA: Add equal volume of Phenol:Chloroform (optional) add ~200ul of Phase-Lock (heavy) gel Spin for 3-5 mins on tabletop c’fuge Aspirate acqueous (top) layer into a clean tube Add 2.5 volumes of 100% EtOH to precipitate DNA (should see clear, viscous DNA coming out of solution) Spin for 5 mins on a table top centrifuge Carefully vacuum off alcohol, taking care not to disturb loosely-adhered pellet (whitish) Wash pellet by adding 500ul 70% EtOH and then spinning 5 mins, and removing alcohol w/o disturbing pellet Resuspend washed pellet in 25-50 ul TE buffer ЫЮдклм , . / 8 S з й ќјќєќєќ№ьшєшє№шќh%6hК_Оh_ jhеKУh5fŸh­%)*bc ЁРС: ; ‡ ˆ Ї Ј Я џ $ T Л х ? Љ й §§ѕ№ѕ№ѕ№ѕ№ѕыѕыѕыууууууууу & Fgd_ jgd_ jgd­% & Fgd­%й § 1hАа/ Ар=!А"А# $ %Аœ@@ёџ@ NormalCJ_HaJmH sH tH DAђџЁD Default Paragraph FontViѓџГV  Table Normal :V і4ж4ж laі (k@єџС(No List йџџџџ)*bc ЁРС:;‡ˆЇЈЯџ$TЛх?Љл˜0€€(˜0€€x˜ 0€€€˜0€€x˜ 0€€€˜0€€€˜ 0€€€˜0€€€˜ 0€€€˜0€€€˜ 0€€€˜0€€€˜ 0€€€˜0€€€˜ 0€€€˜0€€€˜ 0ˆ€€˜ 0ˆ€€˜ 0ˆ€€˜ 0ˆ€€˜ 0ˆ€€˜ 0ˆ€€˜ 0ˆ€€˜ 0Э€€˜ 0Э€€й й й  [a|…ЉЋБЕЮвучМЭ #-5lpЦЪ_cx|ЉВЪЬллиллц;_1жмtkџџџџџџџџџ„а„˜ўЦа^„а`„˜ўo(. „ „˜ўЦ ^„ `„˜ў‡hˆH.‚ „p„LџЦp^„p`„Lџ‡hˆH.€ „@ „˜ўЦ@ ^„@ `„˜ў‡hˆH.€ „„˜ўЦ^„`„˜ў‡hˆH.‚ „р„LџЦр^„р`„Lџ‡hˆH.€ „А„˜ўЦА^„А`„˜ў‡hˆH.€ „€„˜ўЦ€^„€`„˜ў‡hˆH.‚ „P„LџЦP^„P`„Lџ‡hˆH.ц;_1џџџџџџџџ         "х!­%.] %6 fl%n?)ўk2 6O9@нeOЩ4WЕf[Ѓ c_ j15wЯBzд;{ьh~$‹M7ŽAN5fŸ'wЋVTЌ jДК_О;qТеKУќLЩ№<пцc|ёєєџ@€ЇЇ%B ЇЇй`@џџUnknownџџџџџџџџџџџџG‡z €џTimes New Roman5€Symbol3& ‡z €џArial"qˆ№аh2ŠЦYŠЦ“F“F!№ ДДr4ии3ƒQ№мH)№џ?фџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџn?)џџBAC miniprep protocolkresslerkressler ўџр…ŸђљOhЋ‘+'Гй0„˜ИФиф№ $ @ L Xdlt|фBAC miniprep protocol1AC  kresslerrepresres Normal.dotp kresslertp3esMicrosoft Word 10.0@4т0@ bСЈФ@žЙEЦЈФ“FўџеЭеœ.“—+,љЎ0 hpˆ˜  ЈАИР Ш ъф Emory-Yerkespит BAC miniprep protocol Title ўџџџ ўџџџўџџџ !ўџџџ#$%&'()ўџџџ§џџџ,ўџџџўџџџўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџRoot Entryџџџџџџџџ РF№~GЦЈФ.€Data џџџџџџџџџџџџ 1TableџџџџWordDocumentџџџџ"SummaryInformation(џџџџџџџџџџџџDocumentSummaryInformation8џџџџџџџџ"CompObjџџџџџџџџџџџџjџџџџџџџџџџџџўџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџџўџ џџџџ РFMicrosoft Word Document MSWordDocWord.Document.8є9Вq